Abstract FR:

Le cycle cellulaire comporte deux phases majeures: l'interphase et la phase de division cellulaire (phase m). La phase de replication de l'adn (phase s) a lieu pendant l'interphase. Il a ete demontre que, chez les eucaryotes, la phase m est regulee par un complexe constitue d'une proteine kinase cdc2 et d'une sous-unite regulatrice: une cycline b. Par contre, la regulation de l'entree en phase de replication n'est pas encore elucidee. Nous avons utilise les extraits acellulaires d'ufs de xenope, mimant les evenements du cycle cellulaire qui interviennent in vivo, pour etudier la regulation de l'entree en phase s. Ces extraits perdent leur capacite a repliquer l'adn, quand les proteines kinases cdk2 et cdc2 sont enlevees, par affinite sur les billes p13#s#u#c#1, de l'extrait. Dans ces conditions, nous avons montre que la proteine kinase cdk2 est capable de restimuler l'entree en phase s. Des etudes faites par d'autres equipes, utilisant les cellules de mammiferes en culture, ont confirme que cdk2 participe au controle de l'entree en phase s. Nous avons egalement montre que la proteine cdc2, neosynthetisee a partir d'un arnm exogene, est capable d'induire l'entree en phase s dans un extrait ne contenant pas la proteine cdk2 endogene. Ce resultat suggere que la fonction de cdk2 peut etre assuree par cdc2 dans certaines conditions. D'autre part, nous avons clone l'adnc de la cycline e de xenope pour etudier son role potentiel dans la regulation de l'entree en phase s. Nous avons identifie trois adnc (xlcycline e1, e2 et e3). L'expression des arnm xlcyclines e2 et e3 suggere que les proteines correspondantes sont synthetisees au cours de la maturation de l'uf de xenope. Des anticorps polyclonaux anti-xlcycline e detectent plusieurs formes de cycline e dans les extraits d'ufs non fecondes. La cycline e est synthetisee, comme la proteine kinase cdk2, au cours de la maturation ovocytaire quand l'ovocyte acquiert la capacite a induire la replication de l'adn. La localisation nucleaire de la proteine cycline e in vitro et in vitro est en accord avec un role potentiel dans le controle de l'entree en phase s. L'utilisation des extraits d'ufs de xenope nous a permis de montrer que les anticorps anti-xlcycline e inhibent la replication et, dans ces conditions, la proteine cycline e recombinante rajoutee dans l'extrait permet de restimuler la replication. La proteine kinase cdk2 et la cycline e sont donc des partenaires qui participent a la regulation de l'entree en phase s