thesis

Identification et etude de la regulation des canaux k#+ dans la membrane basolaterale des cellules principales de peau de grenouille (rana esculenta)

Defense date:

Jan. 1, 1993

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Institution:

Nice

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

La reabsorption de na#+ a travers l'epithelium cutane de grenouille, est assuree par des canaux na#+ apicaux et des pompes na/k atpase basolaterales. Le k#+ entrant dans la cellule par les pompes est recycle par des canaux situes dans la meme membrane. Par les techniques de patch-clamp nous avons identifie, dans la membrane basolaterale, deux types de canaux k#+, etudie leur role physiologique et le mecanisme de leur regulation. Dans les conditions du transport spontane de na#+, est present un canal k#+ (k#i#r) de 25ps, rectificateur entrant et dont la probabilite d'ouverture (po) maximale pour les courants sortants, lui permet de recycler le k#+ parallelement a l'activite de la pompe na/k atpase. L'activite du canal k#i#r est accrue par l'aldosterone, hormone stimulatrice de la reabsorption de na#+ (10nm, en configuration cell-attached). L'aldosterone regulerait son activite par l'intermediaire du ph intracellulaire qu'elle controle en activant l'echangeur na/h et auquel les canaux k#i#r sont tres sensibles (pk=7,2). L'activite du canal k#i#r est inhibe par l'ouabaine (10##4 m, en configuration cell-attached), l'atp intracellulaire (k#i=50 m) et l'adp (k#i=20 mm). Apres inhibition par l'atp (1 mm), une reactivation du canal est obtenue en ajoutant de l'adp a une concentration physiologique (0,1 mm) au niveau de la face cytosolique du canal. Le rapport atp/adp regule essentiellement par l'activite de la pompe na/k atpase serait implique dans le couplage entre l'activite des canaux k#i#r basolateraux, des canaux na#+ apicaux et de la na/k atpase. Enfin, l'elevation de la ca#2#+ cytosolique, inhibe l'activite du canal k#i#r (k#i=180 m). Lors d'un choc hypotonique et dans les conditions conduisant a une elevation de ca#2#+#i un deuxieme type de canal k#+ (k#c#a: 35ps), est active dans la membrane basolaterale des cellules epitheliales. Ce canal est sensible aux inhibiteurs classiques des canaux k#+ ca-actives. Le canal k#c#a, seul canal k#+ present dans ces conditions, dans la membrane des cellules cutanees de grenouille, serait responsable de la sortie de k#+ impliquee dans la regulation du volume cellulaire. Dans la membrane basolaterale est present egalement, un canal (s#c#a) active par le gonflement cellulaire ou l'etirement artificiel de la membrane (30 mbar) et permeable au ca#2#+ (2-3 ps), avec une solution de ringer, a la ca#2#+ elevee (1 mm), dans la pipette. Ce canal cationique est non specifique, avec une conductance de 30 ps, lorsque la ca#2#+ dans la pipette est inferieure a 1 m. La po de ce canal diminue avec une ca#2#+ cytosolique superieure a 1 m. Le canal s#c#a pourrait etre implique dans l'elevation de la ca#2#+ dans la cellule, observee lors d'un choc hypotonique et necessaire a l'activation des canaux k#c#a