Etude moleculaire des alpha-amylases de differentes cereales
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Paris 6Disciplines:
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Abstract FR:
Une etude comparative des alpha-amylases de grains en germination de plusieurs cereales a ete effectuee. Un microdosage specifique utilise comme substrat le benzilidene p-nitrophenyl maltoheptaoside. Les alpha-amylases de mais, sorgho, avoine et riz ont ete purifiees par precipitation au glycogene et chromatographie d'interaction hydrophobe, les deux isoformes de l'alpha-amylase d'orge parchromatofocalisation et chromatographie d'affinite. Une caracterisation immunochimique, utilisant les reactions croisees avec des anticorps polyclonaux anti-alpha-amylase 1 et anti-alpha-amylase 2 d'orge, montre que chez l'avoine et le sorgho deux antigenes sont presents, et trois chez le mais. Leurs tailles sont voisines (43000 a 47000). Les alpha-amylases d'orge, de sorgho et d'avoine ne semblent pas glycosylees. Une forme de l'alpha-amylase de mais est o-glycosylee. La n-glycosylation de l'alpha-amylase de riz produit, a partir de deux polypeptides de taille differente, des glycoproteines de meme taille. Sept anticorps monoclonaux anti-alpha-amylase 1 d'orge ont ete produits et caracterises. Six sont specifiques de cette forme, le spetieme reconnait egalement la forme 2. Certains anticorps reconnaissent des alpha-amylases de riz, mais ou sorgho