thesis

Isolement et caracterisation dans des plantes transgeniques du promoteur du virus de la mosaique des nervures du manioc (ou cassava vein mosaic virus, csvmv)

Defense date:

Jan. 1, 1997

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Institution:

Toulouse 3

Disciplines:

Directors:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Le virus de la mosaique des nervures du manioc (csvmv) est un virus a adn double brin qui infecte le manioc. Une sequence promotrice s'etendant de la position nucleotidique -443 a +72 a ete isole du genome du csvmv et clonee dans une construction chimerique contenant le gene uida. L'etude de l'expression du gene rapporteur dans des plantes transgeniques de tabac et de riz a montre que le promoteur du csvmv permet une expression forte du transgene dans tous les organes et dans plusieurs types cellulaires. Les regions de plus forte expression sont les elements vasculaires, les cellules du mesophylle et les pointes racinaires. Des experiences de transfection de protoplastes ont de plus montre que le promoteur du csvmv a un niveau d'activite identique au promoteur 35s du virus de la mosaique du chou-fleur, camv. Differentes deletions du promoteur du csvmv ont ensuite ete realisees et leurs effets sur l'expression du gene uida ont ete analysees dans des plantes transgeniques de tabac. Cette etude a montre que l'activite constitutive du promoteur du csvmv est due a la presence de differents domaines presentant des proprietes tissu-specifiques. L'activite vasculaire du promoteur est controlee par un domaine couvrant les nucleotides -178 a -63 alors que qu'un domaine couvrant les nucleotides -222 a -173 dirige l'activite du promoteur dans les tissus verts et dans les racines. Cette region contient une sequence analogue a l'element as1 (ou sequence activatrice 1) ainsi qu'un motif gata, deux elements initialement caracterises dans la region regulatrice du promoteur du camv. Il a aussi ete montre que l'activite du domaine implique dans l'expression du promoteur du csvmv dans les tissus verts est dependante de la presence d'elements localises dans la region comprise entre les nucleotides -149 et -63. Cette derniere ne presente pas d'homologies de sequence avec d'autres promoteurs de caulimovirus suggerant la presence de cis-elements specifiques au promoteur du csvmv.