Abstract FR:

Dans le muscle strie, la myosine ii est polymerisee sous forme de filaments epais dont l'interaction cyclique avec les filaments d'actine produit la contraction. La myosine ii est une proteine hexamerique formee de 2 chaines lourdes et de 4 chaines legeres qui forment 2 tetes globulaires et une queue fibreuse. Dans le filament de myosine, la position des tetes, proche ou eloignee du corps du filament, est determinee par des effecteurs tels que la force ionique, le ph, les cations me#2#+. La sensibilite proteolytique (sp) du site hmm-lmm est une sonde de position des tetes. Nous montrons qu'un site particulier de la chaine lourde de la tete, le site 25-50 k, est affecte par les memes effecteurs: a) l'ordre d'efficacite de differents anions est le meme que celui qui est observe par des mesures de diffraction des rayons x renseignant sur la position des tetes, b) les effets du ph et du mg#2#+ s'accordent avec ceux obtenus d'apres l'analyse de la sonde hmm-lmm. La conformation du site 25-50 k est donc dependante de la position des tetes. De plus, des etudes anterieures par proteolyse limitee et rmn-#1h suggerent que la sp du site 25-50 k est modulee par un court segment n-terminal de lc2 (et lc1?). Quand les tetes sont rapprochees du corps du filament, ce segment interagit avec un site encore indetermine, ce qui augmente la sp du site 25-50 k. Nous avons determine les conditions optimales pour preparer des isomyosines artificielles dont un segment n-terminal de lc1 ou lc2 est enleve par proteolyse, et verifie leur integrite structurale et fonctionnelle. Comme le site 25-50 k est dans une boucle constitutive du site catalytique, nous avons etudie l'effet de la coupure de lc1 et lc2 sur l'activite mg-atpasique de filaments de myosine isoles. La coupure augmente fortement l'activite catalytique, et ce uniquement dans les especes polymerisees. Il est donc suggere que dans le filament, lc1 et lc2 ont un role modulateur sur la fonction de la myosine