Abstract FR:

Le travail presente dans cette these porte sur l'etude de la modulation de la permeabilite jonctionnelle par l'acetylcholine dans une glande exocrine, la glande lacrymale de rat. Dans ce systeme, l'activation du recepteur muscarinique par l'acetylcholine conduit a une reduction de la communication intercellulaire. Nous nous sommes attaches a determiner la voie intracellulaire conduisant a ce decouplage. Nous avons pour cette etude utilise la technique du double patch-clamp qui permet une mesure precise de la permeabilite jonctionnelle et qui est particulierement bien adaptee a l'etude des seconds messagers. Dans ces conditions, un decouplage spontane a ete observe. Le ralentissement de cet effet a pu etre obtenu en inhibant les proteases activees par le calcium et en maintenant les niveaux intracellulaires d'ampc et d'atp. Le recepteur muscarinique est dans ce systeme couple a la phospholipase c et conduit donc a la formation d'inositol-trisphosphate, permettant la liberation de calcium intracellulaire et de diacylglycerol, activateur de la proteine kinase c. Apres avoir verifie que l'augmentation de calcium n'etait pas responsable du decouplage observe, nous nous sommes interesses a la voie de la proteine kinase c. Nous avons demontre que 1) l'activation de cette kinase, provoquait une reduction du couplage jonctionnel, 2) lorsque la proteine kinase c est desensibilisee ou inhibee, la capacite de decouplage de l'acetylcholine est tres nettement reduite. Ces resultats nous ont permis d'etablir que l'etape-cle dans le mecanisme de decouplage par ce secretagogue etait l'activation de la proteine kinase c. Nous nous sommes ensuite interesses a l'acide arachidonique, dont la concentration est modulee apres stimulation par l'acetylcholine. Nous avons demontre que cet acide, et non un de ses metabolites, est capable de reduire la permeabilite jonctionnelle. Cependant son intervention