Abstract FR:

L'objet de ce travail est l'etude des adenosine triphosphate-synthetases (atp-synthetases) a protons fof1 et de leur partie soluble f1 (atpases) extraites de la bacterie thermophile bacillus ps3 (tfof1, tf1) et de chloroplaste d'epinard spinacia oleracea (cfof1, cf1). Les donnees concernant la vitesse d'hydrolyse de l'atp par cf1 et tf1 en fonction de la concentration d'atp a plusieurs concentrations d'ions magnesium ont ete simulees a l'aide de deux modeles contradictoires. Les constantes cinetiques ainsi evaluees ont ete confrontees aux affinites des enzymes pour l'atp, mesurees par une methode chromatographique. La confrontation plaide en faveur du modele attribuant le role de substrat de la reaction a l'atp libre, et non au complexe mgatp. Dans le cas de tf1, l'hypothese d'une heterogeneite fonctionnelle des sites catalytiques permet d'expliquer l'existence de deux modes catalytiques. Les interactions de la tentoxine, tetrapeptide cyclique d'origine fongique, avec cf1 et tf1 ont ete etudiees. Cf1 porte un site de haute affinite pour la toxine, et pourrait porter un second site de faible affinite. En faible concentration, la tentoxine inhibe l'activite atpasique de cf1 depourvue de la sous-unite epsilon, mais la stimule aux concentrations elevees. Malgre des effets beaucoup plus faibles que sur cf1, de memes tendances peuvent etre observees dans l'influence de la tentoxine sur l'activite de tf1. En presence d'un nucleoside diphosphate, l'activite atpasique de tf1 est inhibee de maniere quasi-irreversible par des complexes fluoro-metalliques. Il est possible de reconstituer en liposomes un complexe hybride cfotf1 forme a partir de la partie membranaire cfo de l'atp-synthetase chloroplastique et de l'atpase soluble bacterienne tf1. La capacite de ce complexe a assurer le couplage d'un transport transmembranaire de protons a l'hydrolyse de l'atp montre la compatibilite fonctionnelle de cfo et tf1. La diffusion de neutrons aux petits angles a ete appliquee a l'etude des changements de conformation de cf1 et tf1, sous l'effet de l'activation par le dithiothreitol (cf1), de la presence de nucleotides (cf1 et tf1) et de l'inhibition par les complexes fluoro-metalliques (tf1)