Abstract FR:

L'inactivation de la glucosamine-6p synthase (l-glutamine: d-fructose-6p amidotransferase) d'escherichia coli (glms) par le n#3-(4-methoxyfumaroyl)-l-2,3-diaminopropionate a ete etudiee. Sur la base des donnees biochimiques obtenues et d'apres les resultats de la reaction modele entre la cysteine et le fmdp, le mecanisme d'inhibition de l'enzyme a ete elucide; la perte de l'activite catalytique resulte de la modification covalente de la cysteine aminoterminale qui reagit avec l'inhibiteur selon une reaction de michael. Ce resultat permet de classer le fmdp dans la categorie des marqueurs d'affinite. La proteolyse menagee de l'enzyme d'e. Coli par la chymotrypsine a permis d'isoler deux polypeptides (30kda et 40kda) resultant d'une coupure unique au niveau de tyr#2#4#0. L'analyse des proprietes biochimiques des deux polypeptides a conduit a attribuer une fonction glutamine amidohydrolase au fragment de 40kda et une fonction cetose/aldose isomerase au fragment de 30kda; ces deux activites constituent l'ensemble de l'activite catalytique de la glms. Les comparaisons de sequences avec les proteines de la meme famille par la methode des clusters hydrophobes a mis en relief l'intervention possible d'une triade catalytique cys/his/asp similaire a celle des proteases a serine. Enfin la purification de l'enzyme de candida albicans, proteine tres instable, a ete abordee