Abstract FR:

La topoisomerase ii (topo ii) est essentielle a la vie des cellules eucaryotes. Elle presente un grand interet pharmacologique puisqu'elle constitue la cible privilegiee de nombreux agents anticancereux. Son activite necessite qu'elle soit sous forme dimerique et qu'elle puisse subir de larges changements conformationnels au cours du cycle catalytique. Au debut de ce travail, la structure cristallographique de la topo ii n'etait pas connue et nous ne connaissions du motif de dimerisation de cette enzyme qu'une localisation grossiere dans la partie c-terminale. La torsade d'helices etant un motif de dimerisation tres repandu, notre travail a consiste en son identification dans la sequence de la topo ii humaine. Deux segments ont ainsi ete detectes : 1013-1056 et 1134-1158. Le peptide reproduisant le segment 1013-1056 a ete appele dl. L'etude physicochimique par dichroisme circulaire et pontage covalent des peptides synthetiques montre que seul dl est capable de former une torsade d'helices, le peptide 1134-1158 presentant cependant une forte tendance a adopter une structure en helice. Deux peptides issus de dl ont ete concus : dp est un double mutant lp de dl qui sert de temoin structural negatif ; dlshort correspond a dl delete de 15 residus c-terminaux defavorables a l'helice. Alors que dp presente un taux d'helice faible et est incapable de former une torsade d'helices, dlshort presente des proprietes autoassociatives comparables a celles de dl. Les peptides dl, 1134-1158 et dlshort possedent un pouvoir inhibiteur de la topoisomerase ii, celui de dlshort etant le plus eleve. Il existe donc une correlation etroite entre la propension des peptides a former une helice et leur capacite a inhiber la topo ii. Ceci nous suggere qu'ils alterent l'activite enzymatique en se liant a leurs segments homologues qui forment dans la proteine une torsade d'helices importante pour le maintien de l'interface principale de dimerisation et pour les changements conformationnels.