Abstract FR:

Les genomes simples, comme ceux des virus animaux ou de la levure s. Cerevisiae, initient la replication de leur adn en un site specifique appele origine. Chez les genomes dits complexes, la situation parait beaucoup moins simple : la replication demarre dans des zones plus ou moins vastes, sans toutefois qu'une sequence consensus ait pu etre identifiee. Des promoteurs de transcription sont localises dans ces zones, suggerant que des facteurs de transcription pourraient influencer l'initiation de la replication de l'adn, a l'exemple de ce que l'on rencontre chez les virus eucaryotes. Pour tester cette hypothese, nous avons analyse la replication d'un plasmide rapporteur, microinjecte dans les ufs de xenope, en utilisant deux techniques complementaires : l'electrophorese bidimensionnelle et la pcr competitive. En l'absence de facteur de transcription, ce plasmide initie sa replication sans privilegier de site particulier. Par contre, lorsque l'on assemble un complexe de transcription sur la region promotrice, les origines se positionnent a sa proximite. Ce ciblage des origines de replication ne depend ni de la methylation, ni de la transcription active du plasmide. Par ailleurs, dans une autre etude, l'analyse par electrophorese bidimensionnelle de l'adn de xenope au cours du developpement precoce revele la formation d'une quantite importante d'adn extrachromosomiques circulaires. Apres la transition mid-blastuleenne, ces molecules disparaissent graduellement. Nos resultats suggerent que le choix des sequences precocement excisees ne se fait pas de maniere aleatoire. La production embryonnaire des ces cercles d'adn est independante de la replication de l'adn genomique. Elle necessite une activite issue de l'uf non feconde et un adn matrice. Le role joue par ces cercles au cours du developpement reste largement a preciser. Ces deux etudes experimentales permettent de souligner l'importance de la plasticite du genome embryonnaire au cours du developpement. Chez le xenope, les douze premieres divisions correspondent a une periode de remaniement du genome avant la differenciation cellulaire. L'excision d'adn genomique sous forme d'adn circulaires en est une illustration. Par ailleurs, pendant cette meme periode, les genes sont determines pour leur transcription future et, par consequent, d'apres nos conclusions, pour leur replication.