Identification et caracterisation fonctionnelle de la nucleation des microtubules chez les plantes superieures : mise au point d'un modele in vitro sur noyaux isoles
Institution:
Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008)Disciplines:
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In vivo, l'organisation des microtubules est regulee par des centres organisateurs des microtubules (mtocs). Un des points majeurs dans la comprehension de la dynamique des microtubules dans les cellules de plantes superieures est la caracterisation de tels centres et l'etude de leur mode d'activation. Au cours de ce travail, nous avons developpe un systeme de nucleation des microtubules in vitro. Les resultats montrent que la surface des noyaux de plantes superieures peut agir comme un mtoc. Une proteine de 100 kda, reconnue par un anticorps dirige contre le materiel pericentriolaire des cellules animales, est detectee a la surface de ces noyaux. A l'aide de ce systeme, nous avons montre que des proteines associees aux microtubules (maps), purifiees a partir de cellules de tabac en culture, favorisent la nucleation des microtubules a partir de noyaux de tabac isoles et de centrosomes animaux purifies. Elles affectent differemment l'assemblage des microtubules selon le stade du cycle cellulaire auquel elles ont ete purifiees. Par ailleurs, nous avons cherche a identifier des facteurs impliques dans la regulation de la nucleation des microtubules au cours du cycle cellulaire. Les donnees obtenues suggerent que du materiel essentiel a la nucleation des microtubules est present sous forme soluble dans les cellules de plantes superieures. Parmi ces facteurs pourraient figurer des kinases cyclines dependantes. Ces donnees sont discutees en fonction de la nucleation des microtubules dans les cellules de plantes superieures