Le facteur de transcription tfiiic de saccharomyces cerevisiae. Caracterisation du gene tfc3 et du mutant thermosensible tfc3-tsv115
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Nous avons purifie le facteur de transcription tfiiic de l'arn polymerase iii de saccharomyces cerevisiae. Des sondes nucleotidiques, derivees d'elements de sequence ont permis de cloner les genes tfc1, tfc3 et tfc4 qui codent respectivement pour les sous-unites de 95, 138 et 131 kda de tfiiic. Nous avons caracterise plus particulierement le gene tfc3. C'est un gene essentiel a la viabilite cellulaire, en copie unique, localise sur le bras gauche du chromosome i a environ 300 pb du centromere et qui porte un intron dont l'extremite 3 n'est pas conventionnelle dans la levure. Deux domaines de la proteine codee par tfc3 presentent des similitudes de sequence avec des boites hmg decrites comme etant des motifs de liaison a l'adn. Nous avons montre que la mutation thermosensible tsv115 proche du centromere du chromosome i est localisee dans le gene tfc3 et correspond a une mutation ponctuelle qui remplace l'acide amine glycine 349 par l'acide glutamique (g349e) au niveau de la proteine sauvage. Le facteur tfiiic contenant la sous-unite mutee est tres thermolabile in vitro. Nous avons isole huit genes suppresseurs multicopies de la mutation tsv115. Cinq de ces suppresseurs pcf4/brf1/tds4, rpc10, le gene qui code pour la proteine se liant a la boite tata (tbp), srp40 et rpr1 correspondent a des constituants du systeme de transcription ou a des genes transcrits par l'arn polymerase iii. Les trois autres suppresseurs nop1, fhl1 et urp2 dont la fonction est indeterminee pourraient participer a la biogenese des ribosomes