Abstract FR:

La phosphorylation de proteines est essentielle a la regulation de nombreux processus physiologiques chez les cellules animales. Chez les cellules vegetales, bien que les connaissances actuelles soient beaucoup moins developpees, il est probable que la phosphorylation de proteines soit egalement impliquee dans de nombreux mecanismes intracellulaires. La phosphorylation de proteines chez les mitochondries de tubercules de pomme de terre a ete etudiee en details. Chez ces mitochondries, de nombreux polypeptides sont susceptibles d'etre phosphoryles, le polypeptide phosphoryle majeur etant la sous-unite e1 du complexe pyruvate deshydrogenase. Le profil de polypeptides phosphoryles est affecte par certains substrats respiratoires, par les detergents, et par d'autres composes. La membrane externe des mitochondries est particulierement enrichie en phosphoproteines, alors que membrane interne et matrice contiennent un nombre beaucoup plus restreint de polypeptides phosphoryles. L'etude de la phosphorylation de ces proteines avec des mitochondries intactes et des sous-fractions mitochondriales montrent que le calcium est indispensable a la detection de la grande majorite de ces phosphoproteines. Les membranes mitochondriales ont ete utilisees pour la purification d'activites proteine kinase. La procedure de purification inclut solubilisation avec du triton x-100 et deux etapes de chromatographie sur colonne. Cette procedure resulte en l'obtention de trois activites proteine kinase partiellement purifiees. Les proprietes de ces fractions, dont dependance vis-a-vis du calcium et autophosphorylation, montrent que les proteine kinases mises en evidence dans les membranes mitochondriales sont des membres nouveaux de la famille des proteine kinases calcium-dependantes des plantes