thesis

Etude des facteurs intervenant en cis dans l'epissage de l'intron de 216 nucleotides de l'unite e1a d'adenovirus 2 - clonage et caracterisation du facteur d'epissage humain 9g8

Defense date:

Jan. 1, 1994

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Abstract FR:

Cette these est composee de deux themes axes sur l'epissage des pre-mrna d'eucaryotes superieurs: (1) etude des facteurs agissant en cis dans l'epissage de l'intron de 216nt present dans l'unite e1a d'adenovirus 2. Les deux sites donneurs 12s et 13s, situes respectivement a 121nt et 259nt en aval de l'intron de 216nt, ont des capacites differentes a activer l'epissage de cet intron. Nous avons montre que cette difference est au moins due a: i) la presence d'une structure en epingle a cheveux a l'extremite 3' de l'intron ; ii) la distance separant l'intron de 216nt des deux sites donneurs 12s et 13s. Iii) des resultats preliminaires indiquent qu'une sequence incluant le motif ggag, situee entre les sites 12s et 13s, pourrait etre impliquee dans ces mecanismes d'activation. (2) caracterisation d'un facteur d'epissage humain riche en residus serine et arginine (facteur sr). Nous avons clone le cdna d'un nouveau facteur sr, appele facteur 9g8. La proteine recombinante, exprimee avec le systeme baculovirus/cellules d'insecte, a ete etudiee dans des systemes d'epissage in vitro. Cette proteine possede toutes les caracteristiques des proteines appartenant a la famille des facteurs sr. Le gene du facteur 9g8 a egalement ete clone, sa structure a ete etablie et il a ete localise dans la region p22-21 du bras court du chromosome 2. Nous avons montre que la maturation de son pre-mrna est soumise a un epissage alternatif qui est regule en fonction des tissus. Enfin, l'activite transcriptionnelle de son promoteur a ete analysee par des experiences de transfection