thesis

Dynamique de la chromatine et reparation de l'adn lese

Defense date:

Jan. 1, 1997

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Institution:

Paris 6

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

L'objet de ce travail a ete l'analyse des mecanismes mis en oeuvre par la cellule eucaryote pour retablir une structure chromatinienne destabilisee lors de la reparation de l'adn lese. Dans un premier temps nous avons developpe un systeme acellulaire derive d'extraits d'oeufs de xenope ou de cellules humaines, permettant de suivre simultanement la reparation et l'assemblage de la chromatine sur une matrice d'adn irradiee aux ultraviolets. Nous avons ainsi mis en evidence l'existence d'un lien etroit entre la reparation de l'adn et son assemblage en chromatine. De plus, nous avons demontre l'implication du facteur caf-1 (chromatin assembly factor 1), deja connu pour son role dans le couplage entre replication et assemblage en chromatine. Nous avons ensuite etendu notre observation du couplage entre reparation de l'adn et l'assemblage en chromatine a un troisieme systeme experimental : l'extrait d'embryon de drosophile. Ce systeme s'est avere extremement efficace pour la reparation de l'adn et nous a permis d'analyser la mise en place des nucleosomes au site de reparation. Pour cela nous avons suivi la formation de la chromatine sur un plasmide comportant un adduit unique de cisplatine. Nos resultats montrent que la formation de nucleosomes est initiee au site de reparation et se propage de maniere bidirectionnelle a partir de ce site. De plus nous montrons que le processus d'assemblage peut etre initie avant la phase de synthese reparatrice. Les resultats de cette etude aident a mieux comprendre les aspects touchant au maintien de l'integrite fonctionnelle du genome dans le noyau d'une cellule eucaryote.