thesis

Influence de la source carbonee sur les composants de l'enveloppe cellulaire des corynebacteries productrices d'acides amines

Defense date:

Jan. 1, 2000

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Institution:

Paris 11

Disciplines:

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Abstract EN:

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Abstract FR:

La premiere partie de la these concerne l'etude des composants de l'enveloppe cellulaire des corynebacteries productrices d'acides amines. Une etude preliminaire montre des differences comportementales importantes selon que les cellules soient cultivees en presence de glucose ou de lactate. La synthese de la proteine constituant la couche de surface (proteine ps2, codee par le gene cspb) est accrue en presence de lactate. Cette variation est correlee a l'etandue du reseau proteique cristallin observe a la surface de la bacterie. Par une fusion entre la region amont du gene cspb et le gene lacz, il est montre que l'augmentation de la production de la proteine ps2 en presence de lactate, est due a l'accroissement du niveau d'expression du gene cspb. Un modele de regulation faisant appel a une proteine regulee reconnaissant une structure tige-boucle a l'extremite 5 de l'arnm est propose. La charge energetique, stockee dans le pool adenylique (atp, adt, amp), est plus importante pour les bacteries cultivees en presence de lactate qu'en glucose. Dans des conditions de forte charge energetique, la proteine regulatrice serait induite ou activee, stabilisant alors l'arnm. Pendant cette etude, il a egalement ete montre que la forte agglutination cellulaire, observee lors de cultures en lactate, est dependante de la synthese d'exopolymeres reliant les cellules entre elles et non pas de la proteine ps2 surproduite. Ces exopolymeres, constitues en partie d'exopolysaccharides, conferent un phenotype filant sur milieu solide a l'une des souches de corynebacteries. Une mutagenese transpositionnelle a permis d'obtenir des clones ne possedant pas d'exopolymeres a la surface des cellules. Certains de ces clones presentent une faible quantite de proteine ps2 dans leur paroi. Ce resultat indique qu'il existe une relation entre les differents composants de l'enveloppe cellulaire au niveau de leur synthese ou de leur mise en place. Dans la seconde partie de la these, la secretion d'une proteine (beta-lactamase) issue de e. Coli sous le controle du peptide signal de la proteine ps2 a ete obtenue alors que sous le controle de son propre peptide signal aucune presence de proteine heterologue n'est detectee dans le milieu de culture. Une specificite de la machinerie de secretion mise en evidence est probablement liee aux peptidases signal.