Abstract FR:

L'etude de la testoterone 5 alpha-reductase de la prostate humaine que nous avons realisee comprend trois parties distinctes. Dans la premiere partie, nous definissons les conditions optimales d'etude de l'enzyme, ainsi que les parametres cinetiques apparents vis-a-vis de la testosterone. Nous demontrons qu'il s'agit d'une proteine exclusivement associee a la membrane nucleaire. Dans la deuxieme partie, nous solubilisons la 5 alpha-reductase sous forme active et stable par 0,5 pour cent de n-octyl glucopyranoside (nog). Nous mettons en evidence le caractere fortement hydrophobe de l'enzyme, ainsi que l'existence d'un element endogene necessaire a l'activite 5 alpha-reductase. Nous obtenons aussi une reactivation de l'enzyme partiellement purifiee apres gel filtration par addition de 0,1 pour cent de nog et/ou de 0,1 pour cent d'albumine. Dans la troisieme partie, nous purifions la 5 alpha-reductase au moyen de quatre chromatographies successives: deae-trisacryl, hydroxylapatite, testosterone-sepharose et sepharose 4b. Nous multiplions ainsi l'activite enzymatique specifique par un facteur 30. Par electrophorese sur gel de polyacrylamide en conditions denaturantes nous estimons la masse moleculaire apparente de la 5 alpha-reductase a 42 kda. Les resultats obtenus lors de tests de fixation de lectines et par deglycosylations enzymatiques tendent a prouver que la testosterone 5 alpha-reductase de la prostate humaine est une o-glycoproteine dont la partie peptidique a une masse moleculaire apparente d'environ 30 kda. Parallelement, nous purifions une proteine de 38 kda caracterisee par une affinite pour la testosterone et une association intime a la 5 alpha-reductase