Etablissement et caracterisation fonctionnelle de lignees de cellules tubulaires proximales obtenues par oncogenese ciblee. Contribution a l'etude de la resistance pleiotropique aux drogues cytostatiques
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Cette these rapporte les conditions d'etablissement et les caracterisations de lignees de cellules tubulaires renales proximales de souris. Ces lignees derivees par oncogenese ciblee avec un gene hybride sequence regulatrices du gene de la pyruvate kinase l/sequences codantes des genes t et t de sv40, d'expression tissu specifique, pour le tube contourne proximal du rein notamment. Les lignees (pksv-pct et pksv-pr) ont ete derivees des portions convolutees (pct) et droite (pr) de tubules. La premiere partie de ce travail reprend les donnees actuellement disponibles sur l'etablissement de lignees cellulaires immortalisees par oncogenese ciblee. Les lignees d'origine renale y sont specialement developpees. Les deuxieme, troisieme et quatrieme parties du travail decrivent les differentes methodes experimentales et les resultats obtenus: caracterisation morphologique et enzymatique, controle de l'expression du transgene et proliferation cellulaire, reponses cellulaires aux stimulations hormonales, caracterisation d'un transporteur de glucose dependant du sodium, proprietes d'endocytose. Ces etudes ont ete effectuees sur cellules quiescentes ou proliferatives. La cinquieme partie apres un rappel sur le phenomene de resistance pleiotropique aux drogues decrit les methodes utilisees pour caracteriser les transports transepitheliaux de vinblastine sur les lignees pksv. Les resultats y mettent en evidence le role de la p-glycoproteine membranaire