Abstract FR:

Le facteur de transcription nf-b est implique dans la regulation d'un grand nombre de genes de la reponse immunitaire et inflammatoire. Nf-b est compose d'homo et d'heterodimeres de proteines de la famille rel (p50, p65, c-rel, relb, p52. . . ). Ce facteur est constitutivement actif dans les lymphocytes b et les macrophages, mais dans tout autre type cellulaire nf-b est present dans le cytoplasme sous une forme inactive complexee a une proteine inhibitrice de la famille ib (precurseurs p105 et p100 des sous unites p50 et p52, molecules ib, , et ). Sous l'effet de nombreux stimuli (cytokines, agents mitogenes, virus. . . ), la molecule ib est phosphorylee puis degradee et nf-b est transporte dans le noyau ou il active ses genes cibles. Mon travail de these s'inscrit dans l'etude des mecanismes d'activation ainsi que dans l'analyse des interactions entre les proteines nf-b et ib. J'ai utilise 2 voies approches. La premiere a ete la reconstitution du systeme nf-b dans la levure s. Cerevisiae. A l'aide d'une souche contenant 2 genes rapporteurs (lacz et his3) et de plasmides d'expression pour la p65 et ib j'ai construit un systeme mimant le systeme mammifere. J'ai essaye d'en cloner des effecteurs en transformant ces levures avec une banque d'expression d'adnc humains. Des tests genetiques permettaient de reperer des modulations de phenotype entre les transformants et la souche de depart. La premiere serie d'analyse a permis d'isoler le precurseur p105 de la molecule p50. Le systeme ainsi reconstitue fonctionne et peut servir a caracteriser des proteines impliquees dans cascade nf-b. La seconde serie d'experiences etait basee sur la technique de double hybride. En utilisant la proteine p100 comme appat, nous avons isole 3 clones nouveaux dont l'un code pour une molecule appellee ib. Elle controle specifiquement l'activite de c-rel et de la p65. Son mode de regulation, est proche de celui d'ib et ib.