Abstract FR:

Lorsqu'une plante est agressee par un microorganisme, elle synthetise et accumule au site d'infection des composes toxiques appeles phytoalexines. En reponse a l'infection, le pois ne produit qu'une seule phytoalexine, la pisatine. L'une des possibilites qu'a un pathogene pour passer un tel mecanisme de defense est de detoxiquer la phytoalexine de son hote. Nectria haematococca est un pathogene de plusieurs especes de vegetaux incluant le pois. La survie des isolats dans les champs a revele des variations naturelles dans la capacite a demethyler la pisatine. Les isolats les plus virulents ont une haute activite pisatine demethylase. Cette demethylation est catalysee par un p450 microsomal. Afin d'etudier l'importance reelle de la detoxication de la pisatine dans le pouvoir pathogene de n. Haematococca, nous avons developpe les syntheses d'inhibiteurs potentiels de la pisatine demethylase. Nous avons ete amenes ensuite a cloner le gene codant la pisatine demethylase pdat9 dans la levure s. Cerevisiae. Le cadre ouvert de lecture, amplifie par pcr, est integre dans un plasmide sous le controle d'un promoteur artificiel inductible par le galactose. Quand la culture des cellules de levure est faite en milieu galactose, la pisatine demethylase biosynthetisee est liee a la membrane du reticulum endoplasmique. Pour avoir un test de detection de l'activite pisatine demethylase tres sensible, nous avons developpe la tritiation de la pisatine, qui nous a permis d'etudier les cinetiques d'inhibition