Lectines nucleaires d'une lignee cellulaire tumorale humaine : analyse biologique et biochimique
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Pour contribuer a la recherche du role, encore inconnu, des lectines nucleaires, les variations quantitatives de ces proteines ont ete analysees au cours de la differenciation in vitro des cellules tumorales promyelocytaires (hl60), qui peuvent etre induites a se differencier, avec arret de la proliferation cellulaire, sous l'effet d'agents chimiques. D'autre part, l'isolement et l'identification de certaines lectines nucleaires ont ete obtenus pour la premiere fois. Compte tenu de la propriete des lectines a reconnaitre specifiquement la partie osidique des glcoconjugues, l'analyse quantitative des lectines nucleaires a ete realisee par cytometrie en flux apres incubation de noyaux, isoles et debarrasses de leur enveloppe, en presence de glycoproteines de synthese marquees. L'isolement de certaines lectines a ete effectue a partir d'extraits proteiques nucleaires par chromatographie d'affinite a l'aide d'oses immobilises. De plus, une methode permettant d'une part de selectionner des hybridomes produisant des anticorps anti-lectines nucleaires, d'autre part de detecter des anticorps anti-lectines nucleaires au sein d'un melange d'anticorps diriges contre diverses proteines nucleaires, a ete developpee. Les principaux resultats de ce travail sont: i) l'apport de donnees en faveur d'un role des lectines nucleaires dans la modulation de la proliferation cellulaire et plus precisement dans la regulation des syntheses d'adn; ii) l'isolement de lectines nucleaires reconnaissant le d-glucose et d'autres reconnaissant la n-acetyl-d-glucosamine; iii) l'evaluation de l'importance des cations divalents dans la fixation de ces lectines sur des oses immobilises; iiii) la mise au point d'une technique permettant de selectionner des anticorps monoclonaux diriges contre des lectines nucleaires. En conclusion, ces resultats ouvrent la voie a la realisation de recherches a l'aide d'anticorps dans le