thesis

Etude par co-transfection de la regulation par le recepteur aux oestrogenes, de l'expression des genes hormono-dependants chez la truite arc-en-ciel (oncorhynchus mykiss), dans des lignees cellulaires, ou en culture primatre

Defense date:

Jan. 1, 1993

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Institution:

Rennes 1

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Abstract FR:

Nous avons choisi d'etudier par cotransfection, l'action du recepteur aux oestrogenes de la truite arc-en-ciel (rter) sur des promoteurs heterologues oestrogenodependants, ainsi que son action sur les promoteurs des genes de salmonides codant pour la gnrh, gth, prl et le rter. Pour cela il nous a fallu au prealable mettre au point une methode de transfections pour les cellules de truites (lignees rth-149 et ste-137, ainsi que sur des cultures primaires de cellules hypophysaires). Dans un premier temps, nous avons montre que le rter pouvait activer la transcription des promoteurs de facon strictement oestrogene et ere-dependants. Nous avons ensuite defini, au niveau de la trans-activation, la specificite de reponse de rter a differents steroides (oestrogenes et androgenes en particulier). La sensibilite de reponse a ces steroides, pour differentes doses physiologiques, a aussi ete etudiee en fonction de differents modeles cellulaires (truite et mammaliens). Pour chacune de ces experiences, une comparaison avec le recepteur humain a ete effectuee. Nous avons verifie si les eres potentiels trouves sur les genes de certaines hormones peptidiques chez les salmonides etaient bien fonctionnels. Pour le gnrh et le prl, aucune induction par l'oestradiol n'a pu etre observee dans les cellules de salmonides. Par contre, pour le promoteur gthii, deux eres fonctionnels dans les cellules hypophysaires de poissons immatures ont ete detectes. Nous avons egalement etudie l'action du recepteur a l'oestradiol de la truite arc-en-ciel sur son propre promoteur. Seul un ere situe en aval du site d'initiation de la transcription est fonctionnel. Des etudes de sensibilite de ce promoteur aux oestrogenes ont ete realisees