Mise au point et caractérisation de modèles in vitro de barrière hémato-encéphalique à partir de cellules endothéliales cérébrales de rat ou humaines
Institution:
Paris 5Disciplines:
Directors:
Abstract EN:
The blood-brain barrier (BBB) is constituted by capillary endothelial cells whose function in cerebral homeostasis is regulated by pericytes and astrocytes. Two in vitro BBB models were produced and characterized : - puromycin-selected rat primary cells (RBEC), grown in co-culture with astrocytes, in the presence of hydrocortisone and cAMP. - The immortalized human cell line hCMEC/D3. RBEC and hCMEC/D3 cells grew in monolayers which express junctional proteins at cell-cell contacts, exhibit a low level of sucrose permeability and present functional ABC-transporters (P-gp, MRP, BCRP). In these two models, in vitro permeability coefficients are highly correlated with in vivo data (R=0,94). These original models can be used for drug screening and prediction of BBB permeability and for basic studies of BBB biology.
Abstract FR:
Les cellules endothéliales des capillaires cérébraux constituent la barrière hémato-encéphalique (BHE). Leur rôle dans l'homéostasie cérébrale est régulé par les péricytes et des astrocytes. Deux modèles in vitro sont mis au point et caractérisés : - cellules primaires de rat sélectionnées par la puromycine, cultivées en présence d'astrocytes, d'hydrocortisone et d'AMPc - cellules immortalisées humaines hCMEC/D3. Ces cellules endothéliales cérébrales forment des monocouches qui expriment des protéines de jonctions localisées comme attendu au niveau jonctionnel, présentent une perméabilité paracellulaire très réduite et expriment des transporteurs-ABC fonctionnels (P-gp, MRP, BCRP). Une bonne corrélation des perméabilités in vitro/in vivo (R=0,94) permet la prédiction de l'entrée de molécules vers le cerveau. Reproductibles, ces modèles pourront servir à l'étude de la biologie de la BHE et au criblage de médicaments.