Production et caracterisation d'anticorps monoclonaux a activite catalytique. Application a la synthese de la vanilline
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Dans le but d'obtenir des anticorps capables de catalyser la reaction de substitution electrophile de l'acide glyoxylique sur le gaiacol, premiere etape de la synthese industrielle de la vanilline, nous avons produit en grande quantite vingt trois anticorps monoclonaux diriges contre deux haptenes differents. La specificite de ces anticorps a ete caracterise a l'aide de dosages enzymoimmunologiques. Les tests catalytiques ont demontre qu'aucun de ces anticorps n'etait porteur de l'activite catalytique recherchee, en revanche, d'autres activites ont pu etre mises en evidence. Nous avons notamment montre que trois anticorps monoclonaux possedaient une faible activite catalytique de type esterase et qu'un anticorps etait capable d'accelerer une reaction de decarboxylation oxydative. Cette derniere reaction correspond a la deuxieme etape de la synthese industrielle de la vanilline. L'etude des proprietes catalytiques de cet anticorps a permis de mettre en evidence un mecanisme et une specificite catalytique originales. De nombreux controles ont ete pratiques de maniere a demontrer le caractere abzymatique des activites catalytiques observees. Enfin, certains des anticorps produits ont ete utilise pour realiser deux dosages immunologiques de deux metabolites des catecholamines. Ces dosages interviennent dans le diagnostic de pathologies tumorales comme le pheochromocytome ou les neuroblastomes