Abstract FR:

L'enolase (e. C 4. 2. 1. 11) catalyse la deshydratation reversible du 2d-phosphoglycerate en phosphoenolpyruvate. Nous avons purifie et cristallise l'enolase extraite du muscle de la queue de homard. L'adnc de la proteine a ete amplifie depuis une banque par pcr et sequence. Les donnees de diffraction aux rayons x ont ete collectees sur une source synchrotron. Les cartes initiales de densite electronique sont obtenues par la technique du siras puis avec le modele de l'enolase de la levure. Le modele moleculaire de la proteine etabli a 2,4 angstroms de resolution comprend deux domaines. Le domaine c terminal s'apparente au motif courant du tonneau alpha/beta mais avec une topologie particuliere. La structure de l'enolase en presence de manganese et de l'inhibiteur phosphoglycolate a 2,2 angstroms de resolution revele un seul site metallique. La fixation de l'inhibiteur au site actif de l'enzyme s'accompagne du reajustement de plusieurs boucles dans la structure. Nous avons modelise le substrat de l'enzyme dans la structure du complexe a partir du phosphoglycolate. Ces resultats nous amenent a proposer un nouveau mecanisme pour l'elimination du proton qui initie la reaction de deshydratation. L'histidine 157 qui serait la base catalytique se localise sur une boucle mobile entre deux brins beta qui caracterisent le repliement de l'enolase par rapport au motif habituel des tonneaux alpha/beta