Reconnaissance moleculaire entre membranes pourvues de sites complementaires
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Abstract FR:
L'objectif de cette these est d'elaborer un systeme de reconnaissance moleculaire entre membranes pourvues de sites complementaires, susceptible d'induire des phenomenes analogues a ceux observes en biologie (adhesion, fusion ou agregation entre membranes cellulaires). Une etude preliminaire des interactions entre vesicules de charges opposees, par des techniques complementaires (fluorimetrie, diffusion de la lumiere, microscopie electronique et optique, rmn du cesium) a permis de montrer que les vesicules de charges opposees interagissent par contact suivi d'un echange de lipides sans fusion des compartiments aqueux des vesicules dont la cinetique depend de la taille des vesicules. Deux nouvelles methodes d'analyse des interactions ont ete introduites : i) la sonde fluorescente rh-pe utilisee comme sonde de charge surfacique, ii) la rmn du cesium permettant de detecter simultanement la fusion, les fuites ou la destruction des vesicules. La synthese d'amphiphiles bar et tap, pourvus respectivement des groupes de reconnaissance acide barbiturique et 2,4,6-triaminopyrimidine, a ete ensuite realisee. Apres avoir caracterise des surfaces modeles (vesicule, monocouche, film lb) composees de ces amphiphiles, les interactions entre surfaces tap et bar ont ete etudiees. Le melange des vesicules bar et tap donne lieu a une agregation rapide, suivie d'un echange de lipides lent en competition avec un processus de fusion. Une nouvelle methode d'analyse, utilisant une microbalance a quartz, a ete developpee afin d'acceder a la cinetique du processus d'adhesion entre membranes. L'analyse de la nature de l'interaction a montre l'importance de l'association tap/bar. Une contribution electrostatique dans le phenomene d'adhesion a ete mise en evidence. L'ensemble des resultats s'accorde avec un modele ou les liaisons hydrogene cooperatives entre tap et bar stabilisent l'etat d'adhesion entre membranes.