Abstract FR:

L'objectif de ce travail est d'optimiser l'expression/production du facteur viii recombinant par des cellules d'ovaire de hamster chinois (lignee cho), en developpant des milieux de culture chimiquement definis. Le temps consacre a ce type d'optimisation est reduit grace a la mise en uvre de plans d'experiences. La modelisation de la reponse du systeme biologique permet d'anticiper les resultats en tout point de vue du domaine experimental. Parmi les facteurs definis selectionnes, le butyrate de sodium apparait comme un effecteur tres efficace pour augmenter l'expression du facteur viii du clone tg 1020-22-12. Des etudes ont ete realisees au niveau de l'adn, de l'arn et au niveau posttranscriptionnel pour comprendre le mecanisme d'action du butyrate implique dans l'augmentation de l'expression du facteur viii. Ni amplification genique, ni modification au niveau de la methylation des genes n'a ete observe apres traitement au butyrate de sodium par hybridation moleculaire (southern blot). Cependant l'analyse par northern blot revele une augmentation de la quantite de arnm du facteur viii induit par le butyrate. Les milieux synthetiques mis au point ont ete valides a la culture en masse sur des microporteurs macroporeux de gelatine dans des biogenerateurs de 1 litre