Abstract FR:

La transcription de l'adn requiert une enzyme, l'arn polymerase, et des facteurs generaux de transcription charges de diriger l'arn polymerase vers les genes a transcrire. L'arn polymerase iii de la levure saccharomyces cerevisiae possede 16 sous-unites dont 4 sous-unites specifiques essentielles, c82, c53, c34 et c31 l'etude des relations entre les differentes sous-unites de l'arn polymerase iii a revele une association entre c31, c34, et c82. Par ailleurs, il a ete montre que la sous-unite c34 interagit avec la proteine tfiiib70 appartenant au facteur d'initiation tfiiib. Ces resultats suggerent un role du sous-complexe c31, c34 et c82 dans le recrutement de l'arn polymerase iii par le complexe de preinitiation via la liaison de c34 avec tfiiib70. Dans le but de verifier cette hypothese, une mutagenese systematique de la sous-unite c34 a ete realisee et a permis d'obtenir des mutants affectes dans leur interaction avec la sous-unite tfiiib70. Deux arn polymerases iii possedant une sous-unite c34 mutee ont ete purifiees et testees en transcription in vitro. L'analyse biochimique de ces enzymes a revele que la sous-unite specifique c34 jouait un role non seulement dans le recrutement de l'enzyme mais egalement dans la formation du complexe ouvert. Les deux grandes sous-unites des arn polymerases eucaryotes sont homologues aux sous-unites ' et de l'enzyme bacterienne. Les regions conservees entre ces proteines ont permis de definir des domaines d'homologie. L'etude biochimique d'une arn polymerase iii alteree dans le domaine conserve f a montre que la mutation provoque un ralentissement du passage des sites de pause et une augmentation de la cinetique de clivage de l'extremite 3' du transcrit naissant. Il semble donc que le domaine f intervient dans les mecanismes de translocation de l'enzyme et a une action, directe ou indirecte, sur le processus de clivage.