Abstract FR:

Pour etudier la replication de l'adn eucaryote et sa regulation au cours du cycle cellulaire, nous avons choisi comme systeme modele la levure schizosaccharomyces pombe. Nous avons sequence le gene poli de s. Pombe qui code pour la sous-unite catalytique de l'adn polymerase alpha. Ce gene, unique, est transcrit en un arn messager d'environ 4500 nucleotides. Il code pour une proteine de 1405 acides amines, de poids moleculaire calcule 160 kda, qui presente 7 blocs d'acides amines caracteristiques de l'une des grandes familles d'adn polymerases et 5 blocs specifiques des seules adn polymerases alpha eucaryotes. Des anticorps polyclonaux diriges contre cette proteine inhibent une partie de l'activite adn polymerase totale d'un extrait cellulaire de s. Pombe. Ils reconnaissent specifiquement un peptide de 170 kda present tout au long du cycle cellulaire, avec une augmentation de 3 a 4 fois en phases g1-s, et une forme modifiee: p165, presente uniquement en phases g1-s. Nous avons mis en evidence un gene situe en 5 et transcrit de facon divergente par rapport au gene poli. Ce gene: rpl7b, code pour un peptide predit qui presente de fortes homologies avec differentes proteines ribosomiques l7. Le gene rpl7b est fortement et constitutivement exprime. L'arn messager de poli est faiblement exprime et presente une augmentation de 3 a 4 fois en phases g1-s. Les 320 paires de bases qui separent les atg de rpl7b et poli doivent contenir les signaux responsables de la transcription de ces genes. Nos donnees ne permettent pas encore de trancher entre l'existence d'un promoteur bidirectionnel ou de deux promoteurs divergents. Cette etude devrait deboucher sur l'identification des signaux responsables de la regulation de la transcription du gene poli et sur la caracterisation des facteurs se fixant a ces signaux chez s. Pombe