Abstract FR:

Ets1, le produit du proto-oncogene c-ets-1, est le prototype d'une famille de regulateurs transcriptionnels dont l'activite depends de sequences specifiques d'adn (sites ets). Ets1 est principalement exprime dans les cellules de la lignee lymphocytaire. Les etudes precedentes provenant de notre laboratoire ont montre que la stimulation du recepteur de l'antigene des cellules de la lignee t ou de la lignee b induit une hyperphosphorylation rapide et transitoire de la proteine ets1 sur des residus serine. Cette hyperphosphorylation est dependante de l'accroissement de la concentration en ion calcium qui a lieu durant l'activation de ces cellules. En utilisant une strategie basee sur la mutagenese dirigee et l'analyse de phosphopeptides trypsiques de la proteine, nous avons identifie quatre residus serine de ets1 qui sont phosphoryles dans des cellules cos apres traitement de ces cellules par l'ionomycine. Ces residus serine sont localises dans une region de ets1 adjacente au domaine de liaison a l'adn de la proteine (domaine ets). Au contraire de la proteine ets1 qui perd son activite de liaison au site ets quand les cellules sont stimulees par l'ionomycine, l'activite de liaison a l'adn d'une proteine mutante dans laquelle les quatre residus serine identifies sont transformes en residus alanine n'est pas affectee. Ce resultat indique donc que l'hyper phosphorylation de ets1 induite par le calcium inhibe son activite de liaison a l'adn. Nous avons ensuite montre que les proteines kinases activees par les stimuli mitogenes (map kinases) sont capables de phosphoryler ets1 in-vitro au niveau du residu threonine n 38. La stimulation de cellules cos en culture par le serum provoque une hyper phosphorylation de ce residu in-vivo