Le facteur abfi de saccharomyces cerevisiae et son interaction avec les genes rpc40, rpc160, l2a et l2b. Purification, reconnaissance de l'adn et role dans la transcription
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Nous avons identifie et purifie un facteur de transcription qui se lie en amont des genes rpc160 et rpc40 codant pour deux sous-unites d'arn polymerase de levure. Le site de liaison de la proteine en amont du gene rpc40 correspond a la boite pub (polymerase upstream box). Differents criteres structuraux et fonctionnels ont suggere que le facteur pub pouvait correspondre a la proteine abfi (ars binding factor i). L'identite de ces deux proteines a ete confirmee avec des anticorps diriges contre la proteine abfi. Le facteur purifie par affinite a ete utilise pour determiner la constante de dissociation apparente (5. 10##1#0 m dans mgcl#2) et les parametres cinetiques de la formation du complexe abfi-adn. Une analyse par mutagenese nous a permis d'identifier l'existence de neuf positions importantes pour la liaison de la proteine in vitro et de determiner la sequence optimale de liaison rtcyb(n)#4acg. Cette sequence a permis d'identifier des sites pour abfi en amont de nombreux genes de levure. La liaison de abfi s'est averee importante pour l'activation de la transcription des genes de proteines ribosomales l2a et l2b. Ces resultats suggerent que abfi joue un role fondamental dans la regulation du taux de croissance cellulaire