Abstract FR:

La caracterisation des epitopes continus/sequentiels d'une proteine permet d'obtenir chez l'animal des anticorps de specificites etroites. Lorsque les epitopes ont ete reconnus, ils sont synthetises et couples a une proteine porteuse pour obtenir des conjugues qui, injectes a l'animal, permettront d'obtenir des anticorps. Cette approche a ete appliquee aux isolectines de lathyrus ochrus afin de: 1) valider ce schema experimental, 2) obtenir des anticorps de specificites etroites reconnaissant les lectines, 3) utiliser cs anticorps pour resoudre differents problemes de biologie vegetale. Les epitopes continus ont ete predits a l'aide de divers programmes informatises et ces epitopes, replaces sur un modele tridimensionnel d'isolectine, correspondent a des coudes, des boucles et des feuilles plisses. Une caracterisation immunochimique des epitopes a ete realisee: elle a necessite la synthese de 87 heptapeptides qui ont ete testes vis-a-vis d'anticorps anti-lectine. Une bonne correlation existe entre la caracterisation experimentale des epitopes et leur prediction. Les cartes epitopiques obtenues ont ete validees a l'aide: 1) d'anticorps anti-peptides correspondant aux extremites c-terminales des isolectines, 2) d'un anticorps monoclonal dirige contre les chaines lourdes. Cette methodologie a ete appliquee a deux problemes. Le premier concerne la sequence de la lectine de lentille dont la sequence publiee des chaines lourdes serait incomplete. Le second concerne la maturation de la lectine de pois a partir d'une prolectine