Abstract FR:

Une alteration chromosomique frequente lors des leucemies aigues lymphoides du jeune enfant est la translocation t(4;11)(q21;q23) qui fusionne le gene mll (11q23) au gene af4 (4q21). L'arnm chimerique resultant code pour une proteine de fusion oncogenique. Afin de mieux apprehender le role normal du gene af4 j'ai localise, clone et determine les regions ou le gene af4 est exprime chez la souris. Le transcrit est faiblement detecte dans les tissus adultes a l'exception du rein et de tissus lymphoides tels le thymus ou les ganglions lymphatiques. Dans les tissus lymphoides le transcrit s'accumule lors de l'organogenese. J'ai, ensuite, realise l'inactivation genique d'af4 par recombinaison homologue chez la souris. La perte d'af4 affecte la differenciation lymphocytaire. Dans le thymus, le nombre de thymocytes est reduit, la population double positive cd4+cd8+(dp) est la plus diminuee. Cependant, la maturation n'est pas bloquee puisque des cellules matures simples positives cd4+ ou cd8+ (sp) sont presentes dans la rate. Une population dp exprimant faiblement les marqueurs cd4 et cd8 est accumulee dans les souris mutantes. Chez les souris mutantes, apres traitement a l'hydrocortisone, un retard de la reconstitution du compartiment dp a partir de l'expansion du compartiment dn cd4-/cd8- est visible. Ces resultats indiquent qu'af4 a une fonction au cours de la maturation des lymphocytes t. L'inactivation d'un allele d'af4 et/ou sa fusion avec mll au cours de la translocation pourrait determiner le lignage lymphoide des leucemies. Afin de determiner si le stade auquel se produit la translocation leucemique est important dans le processus leucemique nous avons construit un modele permettant d'induire des translocations entre deux loci restreintes au lignage lymphoide. Une construction contenant des rss (cassette v(d)j) a ete inseree dans la region intronique du gene mll murin correspondant au point de cassure defini chez l'homme. Nos resultats montrent que la presence de la cassette v(d)j induit des rearrangements en cis et en trans, via la recombinase v(d)j, restreints a la lignee lymphoide. L'utilisation de cette strategie permettra de realiser des modeles murins tres proches de translocations leucemiques humaines.