Abstract FR:

Flt4/vegfr3 est un recepteur a activite tyrosine kinase (rtk) apparente a la famille des recepteurs au vegf. Ce recepteur, d'abord present sur des precurseurs endotheliaux, a une expression restreinte a l'endothelium lymphatique chez l'adulte. Le gene vegfr3 humain code pour deux isoformes du recepteur appelees : vegfr3 long et vegfr3 court. Ces deux proteines different seulement dans leurs portions intracytoplasmiques. Vegfr3 long a 65 acides amines (aa) supplementaires en position carboxy-terminale par rapport a vegfr3 court. Dans un test de croissance sur milieu semi-solide, seules des cellules exprimant vegfr3 long sont capables de pousser apres ajout de ligand. Ce resultat montre que contrairement a vegfr3 court, l'isoforme longue du vegfr3 est dotee d'une activite transformante. Parmi les 65 aa supplementaires de la forme longue trois tyrosines sont conservees dans plusieurs especes : y1333, y1337 et y1363. La mutagenese dirigee de chacun de ces residus nous a permis de determiner que la tyrosine 1337 est un site majeur d'autophosphorylation indispensable pour l'activite transformante du vegfr3 long. Nous avons caracterise que la sequence amino-terminale de la tyrosine 1337 correspond a un site de fixation pour le domaine ptb des proteines shc. La fixation de ces proteines sur le recepteur depend de la phosphorylation de y1337 et de l'integrite du domaine ptb. Nous avons egalement defini que la sequence correspondant au site de fixation des proteines shc est cruciale pour la pousse sur milieu semi-solide dependante de la forme longue. Les proteines shc sont phosphorylees en reponse a une stimulation du vegfr3. En utilisant des proteines mutantes de shc nous avons confirme l'existence d'un second site de phosphorylation sur ces proteines : y239/y240. Nous avons montre que les tyrosines y239 et y240 transmettent un signal negatif apres activation de vegfr3 long.