Abstract FR:

La mise au point d'un systeme permettant d'identifier et de cloner des genes chez arabidopsis thaliana a ete effectuee en utilisant les elements transposables ac/ds du mais qui transposent preferentiellement a proximite de leur site initial d'insertion. Le systeme que nous avons elabore est constitue de deux composantes: un element 35s ac immobilise dont le gene de la transposase est place sous le controle du promoteur 35s camv et un element dsphleo mutagene transposant uniquement en presence de la source de transposase. L'element dsphleo conserve respectivement 399 pb et 337 pb des extremites 5' et 3' de l'element ac (5' ac et 3' ac) et porte le gene shble conferant la resistance a la phleomycine. Le gene de la beta-glucuronidase (gus) sans promoteur a ete place pres de l'extremite 3' ac dans le but de detecter des insertions dans des genes par fusions transcriptionnelles. Nous avonsinsere le promoteur 35s camv a l'exterieur de l'element de facon a ce qu'il puisse permettre l'expression du gene gus qui peut alors etre utilise comme marqueur d'excision. 424 transformants portant cette construction ont ete obtenus et plus de la moitie d'entre eux ont ete analyses pour determiner le nombre de copie du transgene. La mobilite de l'element a ete testee par croisement avec des lignees porteuses d'un element 35s ac fixe. Au cours de cette analyse, nous avons pu montrer genetiquement et moleculairement que l'element dsphleo est capable de transposer. De plus, lorsqu'il est transactive par une lignee dont l'element 35s ac fixe est lie a un marqueur morphologique (chlorina 3-a), la frequence de transposition est alors comparable aux frequences les plus elevees decrites dans la litterature. Cependant contre toute attente, les plantes issues d'evenements de transposition de l'element dsphleo conservent la capacite d'exprimer gus. Cette observation nous a conduit a mettre en evidence la presence d'un promoteur dans l'extremite 3' ac. Ce promoteur cryptique dirige la transcription vers la region interne de l'element ac. Certaines caracteristiques de l'expression de ce promoteur fusionne au gene rapporteur de la beta-glucuronidase ont ete etudiees chez arabidopsis. Ce promoteur peut etre activite en cis par la presence des enhancers du promoteur 35s camv. Cette propriete du promoteur 3' ac peut en faire un excellent outil lors d'utilisation de strategies de capture d'enhancers chez arabidopsis et probablement chez d'autres plantes. La decouverte de ce promoteur souleve la question de son role eventuel dans le controle de la transposition de l'element ac chez le mais