Abstract FR:

Durant ce travail, nous nous sommes interesses aux adn topoisomerases presentes dans le troisieme regne primaire: les archaebacteries. Nous avons isole d'un organisme thermoacidophile, sulfolobus acidocaldarius, une topoisomerase active a 75#oc. Cette enzyme, baptisee reverse gyrase, presente une activite tout-a-fait inhabituelle puisqu'elle est capable d'introduire des supertours positifs dans un adn relache. Ayant demontre que l'adn isole d'un virus (ssv1) de sulfolobus est surenroule positivement, il nous parait probable que la reverse gyrase assure le surenroulement positif de cet adn in vivo. En etudiant les proprietes de l'enzyme in vitro, nous avons monte que, de facon tout-a-fait inattendue pour une enzyme realisant une reaction de gyration, la reverse gyrase est une topoisomerase de type i qui necessite la presence d'atp et de magnesium. La purification a homogeneite de la proteine montre que l'activite reverse gyrase est portee par un monomere de 128 kda. Devant le caractere unique de cette enzyme nous avons voulu preciser l'interaction reverse gyrase-adn. Nous avons montre qu'il est possible d'isoler, en absence d'atp, un complexe stable entre la proteine et l'adn. Dans ce complexe, la reverse gyrase est attachee a une extremite 5 de l'adn par l'intermediaire d'une liaison phosphotyrosyl. Enfin, nous avons montre que la fixation stchiometrique de la reverse gyrase induit une diminution du nombre d'enlacements des brins de la double helice d'adn. Cet evenement serait une des premieres etapes de la reaction de gyration