Rf-3, facteur de terminaison de la traduction chez escherichia coli
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Paris 6Disciplines:
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Le but de cette these est d'approfondir les etudes sur la terminaison de la synthese des proteines chez escherichia coli qui est le systeme le mieux connu actuellement. Dans cette optique nous avons purifie et sequence rf-3, un facteur precedemment caracterise en tant qu'amplificateur de la terminaison. En parallele nous avons identifie un gene inconnu en selectionnant un amplificateur de la terminaison. Ce gene clone et sequence s'est revele codant pour rf-3 et nous l'appelons prfc (polypeptide chain release factor 3). Par la suite nous avons caracterise rf-3, in vivo en employant differents systemes de suppression de la terminaison, in vitro en rapprochant les conditions de l'essai aux conditions physiologiques. La these comporte une introduction divisee en deux parties, la traduction chez escherichia coli, et la terminaison de la synthese des proteines. Les materiels et methodes citent les techniques utilisees et detaillent les protocoles nouveaux ou changes. Les resultats decrivent en trois parties l'identification du facteur, la caracterisation d'un mutant zero dans differents contextes genetiques, et l'etude de l'influence du facteur sur le mecanisme de la terminaison in vivo et in vitro. La discussion tente de developper un modele sur la fonction de rf-3