Abstract FR:

La premiere partie de ce travail est la mise au point d'une technique d'isolement des mitochondries de cellules en culture permettant la caracterisation biochimique des mitochondries isolees de lignees lymphoblastoides humaines et l'etude de la synthese proteique mitochondriale. Disposant de cet outil, l'evolution des activites de la chaine respiratoire et de la proportion d'adnmt mute a ete etudiee dans les cellules en culture d'un enfant atteint d'un syndrome de pearson et presentant une deletion de l'adnmt a l'etat heteroplasmique. Une retombee immediate de cette etude a reside dans la possibilite ouverte au diagnostic antenatal de ces atteintes. En particulier, la determination de conditions de culture permettant le maintien des deficits de la chaine respiratoire a autorise les premiers diagnostics antenatals dans des cas ou le deficit s'exprimait clairement dans les fibroblastes du premier enfant atteint. Le second volet de cette these a ete consacre a l'etude enzymologique et moleculaire d'un deficit en fumarase chez deux surs nees de parents cousins germains et presentant une encephalopathie progressive. Chez les deux patients, l'activite de la fumarase est profondement deficitaire dans tous les tissus testes. Le sequencage de l'adnc de la fumarase a revele une substitution de base en position 955 retrouvee, a l'etat homozygote, chez les deux enfants atteints et a l'etat heterozygote, chez les deux parents. Cette substitution modifie un acide amine glutamate en glutamine dans le domaine de la proteine le plus conserve au cours de l'evolution et candidat pour le site actif de l'enzyme. Ce travail est la premiere caracterisation moleculaire d'une mutation d'un gene nucleaire occasionnant un deficit dans une enzyme du cycle de krebs chez l'homme