Mutagenese insertionnnelle a l'element p et caracterisation moleculaire du locus torso-like : clonage du gene torso-like et de la sous-unite beta du gene de la proteine kinase calcium/calmoduline-dependante, chez la drosophile
Institution:
Paris 6Disciplines:
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Ce travail se divise en trois parties. Premierement, nous avons effectue une mutagenese par insertion du transposon p pour constituer une collection d'environ 1500 mutants. Nous avons repertorie les mutations a effet maternel ou zygotique qui alterent la morphologie de l'embryon. Nous avons identifie 40 mutations dont 20 sont de nouveaux loci. La localisation de ces nouvelles mutations a ete effectuee par recombinaison genetique et par hybridation in-situ sur chromosome. Deuxiemement, nous avons etudie la mutation a effet maternel torso-like (tsl). Ce gene est implique dans une cascade d'activation aboutissant a induire les parties terminales de l'embryon. L'expression de tsl est localisee dans les cellules folliculaires migrantes et polaires. Ce gene code pour une nouvelle proteine qui contient un peptide signal, suggerant qu'elle est secretee. L'utilisation d'anticorps polyclonaux montre qu'au stade blastoderme la proteine tsl forme un gradient de concentration symetrique aux deux poles de l'embryon. A partir de lignee transgeniques, nous avons montre que l'expression ubiquitaire de tsl dans des femelles tsl mutantes induit les elements du pattern terminal et supprime la formation de l'abdomen. Ces resultats suggerent que tsl est le ligand qui se lie au recepteur torso. Troisiemement, nous avons mis en evidence un gene voisin, codant pour la sous unite beta de la proteine kinase calcium/calmoduline-dependante. Ce gene tres grand est exprime dans le systeme nerveux durant l'embryogenese, la vie larvaire et pupale. Quoique sa sequence en acides amines soit moderement conservee entre le rat et la drosophile, sa fonction dans la regulation de la transcription est bien conservee