Abstract FR:

Les arylamine n-acetyltransferases (nat) catalysent la biotransformation de nombreux xenobiotiques. Il existe deux isoformes de nat humaines, nat1 et nat2, fonctionnellement distinctes malgre le haut degre d'identite de leurs sequences primaires. Le gene nat2, d'expression essentiellement hepatique, determine le polymorphisme classique de n-acetylation, variation pharmacogenetique commune du metabolisme des medicaments. Treize variants alleliques nat2* ont ete relies a une capacite de n-acetylation et leur association genere deux phenotypes nat2, dits acetyleur lent et acetyleur rapide. Ce polymorphisme a ete associe au risque d'intolerance a certains medicaments comme l'isoniazide (antituberculeux) ou les sulfamides (antibacteriens). Ce travail a permis d'etudier les bases moleculaires de l'activite nat sous trois aspects: relation avec la toxicite medicamenteuse, variabilite genetique, et relation avec l'activite catalytique de ces enzymes. Nous avons d'abord montre grace a une approche genetique, que l'affaiblissement des capacites d'acetylation observe chez des malades atteints de sida et plus particulierement chez ceux intolerants aux sulfamides serait probablement un effet physiopathologique de l'infection virale, plutot qu'un trait determine par le genotype nat2*. Au cours d'une seconde etude menee chez deux populations d'afrique noire sub-saharienne, region fortement touchee par la tuberculose, nous avons identifie les genotypes nat2* par reaction de polymerisation en chaine specifique d'allele. Ceci nous a permis de prevoir la repartition phenotypique du polymorphisme nat2 et de documenter certaines relations phylogenetiques. Enfin, a l'aide d'un systeme d'expression heterologue procaryote et des techniques de mutagenese dirigee, nous avons etudie le role d'acides amines hautement conserves dans l'activite des enzymes nat1 et nat2. Le residu cys#6#8 est apparu comme etant l'acide amine actif le plus probable de nat1, comme demontre auparavant pour nat2. Nous avons egalement montre que les residus arg#9 et arg#6#4 pourraient intervenir en stabilisant la conformation active de ces enzymes, probablement par la mise en jeu de liaisons ioniques. Ces arginines ne semblent pas repondre aux criteres attendus pour etre impliquees directement dans le mecanisme de catalyse basique generale precedemment propose pour les nat