Abstract FR:

Ce travail a concerne la comprehension des mecanismes moleculaires qui dirigent la reconnaissance specifique de la methionine et son activation en methionyladenylate par la methionyl-arnt synthetase d'e. Coli. Les regions importantes pour la reconnaissance specifique de la methionine ont ete identifiees par deux approches: i) caracterisation de deux mutants chromosomaux de la methionyl-arnt synthetase, auxotrophes pour la methionine, qui a permis de reperer deux regions supposees intervenir dans la fixation de la methionine; ii) etude des residus du site actif identifies, par l'approche precedente ou d'apres la structure cristallographique de l'enzyme, en utilisant la technique de la mutagenese dirigee. D'autre part, l'activite de formation du methionyladenylate est etroitement dependante de la liaison forte par l'enzyme d'un ion zinc. Nous demontrons qu'un motif, riche en cysteines, forme le site de fixation du zinc. La structure tridimensionnelle d'un peptide isole de la metrs comprenant ce motif, resolue par #1h rmn, est analogue a celle de la rubredoxine et celle d'une proteine retrovirale gag. Enfin, nous demontrons que le role du zinc et des quatre cysteines qui le ligandent est de contraindre certains residus du site actif dans une conformation optimale pour leur intervention dans la catalyse