Abstract FR:

Au cours de cette these, je me suis interessee aux mecanismes cellulaires et moleculaires responsables de la divergence des deux premiers lignages cellulaires dans l'embryon de souris. La premiere divergence cellulaire est decelable des le stade 16 cellules par la presence de deux populations morphologiquement differentes qui sont a l'origine de la masse cellulaire interne (mci) et du trophectoderme presents dans le blastocyste. Cette divergence est la consequence de la polarisation des blastomeres lors de la compaction et de l'existence de divisions inegales. Le role majeur joue par le pole apical de microvillosites lors des divisions asymetriques nous a conduit a etudier l'expression de l'ezrine, proteine associee aux microvillosites. L'ezrine et son arnm sont presents durant le developpement precoce. La proteine se localise dans les regions riches en microvillosites et segrege totalement dans les cellules polarisees apres une division asymetrique. Deux formes phosphorylees sur tyrosine sont presentes pendant le developpement precoce et une troisieme forme, non phosphorylee sur tyrosine, apparait a la compaction. Lors de la differenciation epitheliale de mci isolees, cette forme est majoritaire. Le recrutement de l'ezrine a la membrane ne semble pas necessiter cette modification post-traductionnelle mais elle semble necessaire pour sa stabilisation a la membrane apicale des cellules externes. Des arnm codant une ezrine couplee a la gfp sont microinjectes dans les embryons et l'observation en videomicroscopie permet de suivre la dynamique de la proteine exogene ainsi que le developpement de l'embryon. L'ezrine entiere exogene se localise normalement et le developpement des embryons est n'est pas perturbe. Les 53 derniers acides amines sont necessaires pour la localisation correcte car lorsqu'ils sont deletes, elle reste associee au cortex des cellules et n'est pas relocalisee a la membrane apicale apres la compaction. Le developpement des embryons est normal.