Abstract FR:

Les recepteurs couples aux proteines g constituent la plus grande famille de recepteurs, avec plus de 250 membres. Ces recepteurs transmettent de nombreux signaux externes provenant d'hormones, de facteurs de croissance, de neuromodulateurs et d'autres molecules et ils sont impliques a la fois dans des processus physiologiques et physiopathologiques. Dans ce travail de these, deux recepteurs couples aux proteines g ont ete analyses, les recepteurs de la galanine et de la thrombine, dont nous avons etudie les aspects structure/fonction et l'activation des voies de signalisation des proteines g dans des cellules cibles. La thrombine est une protease a serine qui exerce de nombreux effets biologiques. Dans la lignee ccl39 (fibroblastes de hamster chinois), la thrombine est un mitogene puissant qui active la voie ras/map kinase, sensible a la toxine pertussique, impliquee dans la proliferation cellulaire. Nous avons etudie les mecanismes a l'origine de l'activation de cette voie par le recepteur de la thrombine. Nos resultats montrent que la thrombine induit au moins deux evenements en amont de la voie ras/map kinase: i) la stimulation de tyrosine kinases de la famille de src et ii) la phosphorylation des proteines adaptatrices shc et leur association avec grb2 et sos. Ces deux evenements semblent independants, au moins dans les etapes precoces. Nos donnees obtenues par l'expression de formes sauvages ou mutees de shc suggerent que shc joue un role cle dans la transduction de l'effet mitogenique de la thrombine. Dans la deuxieme partie de ce manuscrit, les experiences de solubilisation et de purification d'un recepteur de la galanine fonctionnel sont decrites. Le recepteur a ete solubilise a partir de cerveaux de rat et purifie, par une methode de chromatographie d'affinite en une seule etape, a partir de cerveaux de porc. Nous avons aussi montre que le recepteur de la galanine peut se coupler, dans le cerveau de rat, a une proteine g sensible a la toxine pertussique. Ces resultats devraient faciliter l'analyse des mecanismes d'action de la galanine dans le systeme nerveux central