Le facteur de demarrage if2 chez escherichia coli : structure du gene infb et etude des deux formes if2a et if2b
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Paris 7Disciplines:
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Le demarrage de la proteosynthese chez escherichia coli est catalyse par trois facteurs de demarrage if1, if2 et if3. Deux formes d'if2 existent dans la cellule et sont codees par le meme gene infb. Nous avons determine la sequence adn d'infb. L'analyse de la structure primaire d'if2 a revele des caracteristiques inhabituelles de la proteine dans sa partie n-terminale. Par ailleurs, une region centrale d'if2 presente de fortes homologies avec le domaine de liaison du gtp du facteur d'allongement ef-tu. A l'aide d'un fragment proteolyse d'if2, nous avons montre que les principaux centres actifs de la proteine se trouvent dans ses 2/3 c-terminaux. Les deux formes d'if2 different par leurs parties n-terminales. Nous avons etabli que le gene infb utilise deux sites de demarrage de la traduction pour exprimer if2a et if2b. Un codon gug situe 471 nucleotides en aval de l'aug d'if2a est le principal codon de demarrage de la forme courte d'if2. Une caracterisation plus poussee du site d'if2b a revele la presence d'un second codon de demarrage, situe 21 nucleotides en aval du premier. Il existe donc deux especes tres proches d'if2b (if2b1 et if2b2) dans la cellule. Enfin nous avons construit et analyse des souches qui n'expriment qu'une seule forme d'if2 (if2a ou if2b1/b2): chaque forme permet la croissance d'e. Coli mais elles ne sont pas fonctionnellement equivalentes