thesis

Plusieurs familles d'elements transposables sont actives et mutagenes chez nicotiana tabacum : caracterisation de slide, premier element autonome de type ac chez les solanacees

Defense date:

Jan. 1, 1995

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Institution:

Paris 11

Disciplines:

Abstract EN:

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Abstract FR:

Differentes familles d'elements transposables endogenes au tabac ont ete caracterisees dans le gene codant pour la nitrate reductase (nr) de mutants d'insertion selectionnes in vitro a partir de plantes haploides derivees de la lignee tl, porteuse d'une instabilite somatique chlorophyllienne et caracterisee par un fort niveau de mutabilite en cultures cellulaires. Nos resultats demontrent que plusieurs classes d'elements, particulierement des retrotransposons, sont presentes et mutagenes dans le genome du tabac. Les familles de retrotransposons semblent constituees par des populations chimeriques du point de vue evolutif, dans le genome du tabac et de l'espece voisine n. Plumbaginifolia. Parmi les mutants d'insertion, nous avons egalement caracterise deux insertions d'une nouvelle famille d'elements de type ac, que nous avons nommee slide. L'element slide-124 est long de 3,7 kb et presente des homologies avec des domaines conserves des transposases de ac, tam3 et hobo. Slide est capable de s'exciser du gene nr dans des tissus foliaires, et son excision laisse des empreintes similaires a celles laissees par les autres elements de plantes. L'excision de slide est stimulee par la culture in vitro, et des clones revertants nr+, associes a des evenements d'excision, sont induits a taux eleve dans des cultures de cals. Les lignees de tabac derivees du mutant tl semblent specifiquement caracterisees par un etat non methyle de quelques elements de la famille multicopie slide. La fonctionnalite de slide a ete analysee en testant l'excision de slide hors de genes marqueurs en expression transitoire. L'element slide est capable de s'exciser dans des protoplastes de tabac de type sauvage, et une version defective de l'element y est transactivee. L'element slide-124, mais pas la version deletee, est capable de s'exciser dans des protoplastes de laitue. Nos resultats demontrent que slide porte les fonctions requises pour sa propre mobilite, et represente le premier element autonome de type ac caracterise chez les solanacees