Abstract FR:

L'objectif de ce travail de these a consiste a rechercher les elements controlant l'assimilation du nitrate. Le nitrate penetre dans la plante par un transporteur actif, puis il est reduit en nitrite par la nitrate reductase (nr) et en ammonium par la nitrite reductase (nir). Ces enzymes sont regulees par divers facteurs environnementaux, induits par le nitrate et reprimes par la glutamine. Nous avons tente de caracteriser les elements impliques dans l'induction par le nitrate des promoteurs des genes nia de tomate et nii de tabac, codant pour la nitrate et la nitrite reductase. Des constructions ont ete realisees avec le gene rapporteur luc (luciferase) sous controle des promoteurs des genes nia (pnia-luc) et nii (pnii-luc). Ces constructions ont ete testees en expression transitoire a l'aide du canon a particules que nous avons mis au point au laboratoire. Lorsque les bombardements ont ete realises sur des plantes n. Plumbaginifolia sauvages, nous avons constate une absence de regulation par le nitrate pour la construction pnia-luc et une tres faible induction pour la construction pnii-luc. Nous avons emis l'hypothese que l'introduction d'un grand nombre de copies des genes, apres bombardement, titre des facteurs intervenant dans la repression par la glutamine. D'autre part, nous avons caracterise le mutant mea#r 115-5 de n. Plumbaginifolia selectionne pour sa resistance au methylammonium (analogue structural de l'ammonium). Ce mutant a ete isole pour sa capacite a croitre sur 10 mm de methylammonium en presence d'1mm de nitrate (condition non permissive pour le type sauvage). Nous avons constate que la -glutamylmethylamide (analogue structural de la glutamine), accumulee dans la plante, n'a pas d'effet sur la reduction du nitrate. En revanche la regulation du transport du nitrate est modifiee chez le mutant mea#r 115-5 et semble etre la cible de la mutation