Etude d'un gene hsc70 de poisson-zebre (danio rerio) : discussion de son implication au cours de l'embryogenese precoce
Institution:
Paris 7Disciplines:
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Les proteines de stress (hsp) constituent des familles multigeniques tres conservees a travers le regne du vivant. Cette these traite de l'implication du gene hsc70 au cours de l'embryogenese precoce du poisson-zebre (danio rerio). Pour elucider le role potentiel des genes de la famille hsp70 au cours du developpement, l'isolement et la caracterisation d'un adnc correspondant au gene hsc70 de poisson-zebre ont ete realises. Les transcrits d'hsc70 sont exprimes en conditions normales mais sont aussi induits en cas de choc hyperthermique. Des experiences de neosynthese des proteines totales et d'immunoblot ont confirme ces resultats au niveau de la proteine hsc70. L'expression spatio-temporelle des transcrits hsc70 a ete realisee par northern blot et par hybridation in situ sur embryons entiers. Les messagers hsc70 sont presents tout au long du developpement. Un enrichissement tissu-specifique a ete detecte dans certaines parties du systeme nerveux central, des yeux et des somites. Pour approfondir ces resultats et tenter d'apprehender la signification fonctionnelle de l'expression d'hsc70 au cours du developpement precoce, une etude in vivo d'inhibition de l'expression des messagers, ou au contraire de surexpression des transcrits hsc70, a ete engagee. Les resultats obtenus par la strategie antisens ont permis de mettre en evidence un role des transcrits hsc70 des les premiers stades de division. Les experiences de surexpression des messagers ont permis de montrer une periode de sensibilite particuliere a la quantite de transcrits hsc70, correspondant au deroulement des processus de somitogenese et de neurogenese. Ces resultats corroborent les donnees d'expression d'enrichissement tissu-specifique de ces transcrits. Ces resultats sont en faveur d'une implication du gene hsc70 tant au niveau des processus de division cellulaire que lors de mecanismes de differenciation au cours de processus du developpement tels que la somitogenese ou la neurogenese.