Abstract FR:

Notre travail a consiste a l'etude moleculaire des interactions entre ces proteines impliquees dans les etapes precoces des voies de signalisation de l'insuline et de l'igf-i. Dans un premier temps, nous nous sommes interesses a l'interaction entre irs-1 et p85 d'une part, et entre irs-1 et shp-2 d'autre part. A l'aide de mutants ponctuels d'irs-1, nous avons pu determiner dans la cellule intacte (cellule 293), que la tyrosine 608 d'irs-1 etait le site principal d'interaction d'irs-1 avec p85. Les tyrosines 1172 et 1222 d'irs-1 constituent les sites d'interaction avec shp-2. De plus, nous avons mis en evidence une dephosphorylation d'irs-1 par shp-2 in vitro. Dans un second temps, nous nous sommes interesses a un nouveau substrat du recepteur de l'insuline, la proteine gab1. En utilisant deux approches differentes (systeme double hybride dans la levure et expression transitoire dans les cellules 293), nous avons determine les residus tyrosine de gab1 impliques dans les interactions avec la pi3-k et la shp-2. En effet, la tyrosine 472 de gab1 est le site principal d'interaction avec p85. Les tyrosines 447 et 589 de gab1 participent a cette interaction mais de facon moins importante. Concernant l'interaction de gab1 avec shp-2, nous avons montre que seule la tyrosine 627 de gab1 joue un role dans cette association. De plus, nous avons mis en evidence le role crucial du domaine ph de gab1 pour la phosphorylation de gab1 par le recepteur de l'insuline dans la cellule intacte. Bien que la pi3-k et shp-2 s'associent preferentiellement avec les substrats du recepteur (proteines irs et gab1), nous avons egalement montre a l'aide du systeme double hybride dans la levure, que shp-2 interagit directement avec le recepteur de l'insuline et le recepteur de l'igf-i.