Caracterisation moleculaire et regulation des genes codant pour des permeases
Institution:
Paris 11Disciplines:
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Abstract FR:
Le champignon aspergillus nidulans possede au moins trois permeases qui permettent l'entree dans la cellule des purines et de leurs analogues. Les genes uapa et uapc codant pour des permeases de l'acide urique et de la xanthine et le gene azga codant pour une permease de l'hypoxanthine, l'adenine et la guanine ont ete identifies genetiquement et caracterises physiologiquement. Le gene uapa a ete sequence et il a ete montre qu'il code pour une proteine de 595 acides amines (mr 63,365). Elle se caracterise par son profil hydrophobique tres eleve. Elle appartient probablement a une nouvelle famille de proteines de transport conservee chez les procaryotes et les eucaryotes. Des mutants de perte de fonction dans le gene uapc ont ete obtenus et analyses. Les resultats presentes suggerent fortement que le gene uapc code pour une permease a large specificite impliquee dans l'incorporation de toutes les purines naturelles dont le transport est effectue par les produits des genes uapa et azga. La permease codee par le gene uapc appartient aussi a la nouvelle famille de proteines de transport ci-dessous nommee. Le gene uapc a ete clone et la regulation de son expression etudiee. L'analyse des transcrits montre que les genes uapa et uapc sont soumis au controle de la part des produits des genes regulateurs uay (specifique de la voie de degradation des purines) et area (facteur gata implique dans la repression generale par l'azote). Des mutations agissant en cis du gene uapa ont ete caracterisees. La mutation uap100 entraine une duplication d'une sequence contenant deux sites gata et un seul site d'attachement de la proteine uay. Elle supprime l'effet negatif sur l'expression du gene uapa d'une mutation dans le doigt de zinc de la proteine area (area102) mais elle reste dependante de la presence des proteines fonctionnelles area et uay. Les mutations uap302 et uap310 suppriment specifiquement l'effet de l'allele area102. Les deux mutations changent un site sauvage tgataa en ggataa. La base changee est impliquee dans des contacts hydrophobes avec l'acide amine mute chez area102. La base changee est impliquee dans des contacts hydrophobes avec l'acide amine mute chez area102