Abstract FR:

Le mutant de tabac lab 1-4 a ete selectionne pour sa resistance, a l'etat de cal, au triazole herbicide lab 170250f. Ce mutant accumule 10 fois plus de sterols que le tabac sauvage. Des resultats preliminaires ont montre que chez ce mutant, l'activite 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme a reductase (hmgr) est augmentee. Nous avons montre qu'alors que les k#m vis-a-vis du 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme a etaient semblables pour les tabacs de genotypes sauvage et mutant, la v#m#a#x etait 5 a 6 fois superieure pour le mutant lab 1-4. Au vu de ces resultats, les quantites de proteines hmgr detectees par western blot etant equivalentes pour les deux genotypes de tabac, nous avons privilegie l'hypothese que la mutation a l'origine du phenotype lab 1-4 porte directement sur une proteine hmgr. Ainsi, afin de determiner l'origine moleculaire de la surproduction de sterols, nous avons clone des adnc codant pour l'hmgr a partir de banques de cals de tabac de genotypes lab 1-4 et sauvage. Nous avons obtenu une sequence specifique au genotype lab 1-4 dans laquelle un residu de proline est remplace par une serine. L'expression de cet adnc dans une souche de levure deficiente en activite hmgr n'a revele aucune difference d'activite hmgr par rapport aux activites des produits des autres adnc. Cependant dans des tabacs transgeniques exprimant l'adnc specifique au genotype lab 1-4 la composition sterolique mesuree est voisine de celle du mutant lab 1-4 et suggere que la mutation ponctuelle sur le nouvel adnc soit la mutation lab 1-4.